SP2/0-Ag14细胞连续传代及增殖检查实验

◆连续传代培养实验

1.材料及方法：1:8分种，72小时传代，1640培养基，10%血清，37℃，T25培养瓶，对照为澳洲胎牛血清

2. 实验结果

2.1细胞形态

对照（第六代72小时）	Royacel（第六代72小时）

2.2 细胞计数

◆细胞增殖检查实验

1.材料及方法：以1×10⁴个/ml细胞浓度接种8瓶，每天取1瓶计数，绘制细胞生长曲线，三批次产品分别做三次实验，每个时间点的细胞密度取平均值，绘制曲线；细胞经有限稀释后，以3个细胞/孔接种，96孔/样，接种后24小时观察记单细胞孔数并标记，168小时观察已标记孔中克隆生长的孔数，计算绝对克隆率，以澳洲胎牛血清为对照血清计算相对克隆率。

2. 实验结果

2.1生长曲线

2.2 倍增时间

2.3克隆率

◆结果分析

1. 细胞连续六次传代，第六代72小时，Royacel与对照血清培养的SP2/0-Ag14细胞铺满率均达到90%。细胞形态饱满均一、立体感强、光泽性好；细胞计数结果表明经连续六次传代后Royacel细胞密度、细胞活率与对照血清无明显差异；

2. 通过细胞增殖检查可知：Royacel 胎牛血清各批次间SP2/0-Ag14细胞倍增时间、峰值浓度、克隆无明显差异。

Royacel 胎牛血清培养SP2/0-Ag14细胞具有良好的稳定性。