MRC5细胞连续传代及生长曲线实验

◆连续传代培养实验

1. 材料及方法：细胞1:4分种，72小时传代，连续6代培养。MEM培养基，10%血清，37℃、5%CO₂，T25培养瓶（透气），对照为澳洲胎牛血清

2. 实验结果

2.1细胞形态

2.2 细胞计数

◆生长曲线实验

1. 材料及方法：以2×10⁴个/ml细胞浓度接种8个T25方瓶，每天取1瓶计数，绘制细胞生长曲线，三批次产品分别做三次实验，每个时间点的细胞密度取平均值，绘制曲线。澳洲胎牛血清为每次实验对照血清。

2. 实验结果

◆结果分析

1. 细胞连续六次传代，Royacel与对照血清培养的MRC5细胞铺满率均达到97%。对照细胞间隙较大、细胞表面粗糙，黑色颗粒物较多，细胞老化趋势较明显； Royacel细胞饱满光滑，干净整齐，呈良好的成纤维细胞形态，无老化现象；细胞计数结果表明：第六代时对照细胞密度与第三代相比下降19.7%， Royacel 细胞密度下降7.4%，连续传代稳定性优于对照血清。两个血清在细胞活率上没有差异；

2. 通过生长曲线可知：Royacel 胎牛血清和对照血清（使用同一批次做对照）细胞增殖和维持方面差别不大。Royacel胎牛血清各批次间细胞倍增时间及峰值浓度的偏差均＜10%。不同批次血清，观察MRC5细胞增殖和维持能力无明显差异；

Royacel 胎牛血清在MRC5细胞培养方面具有良好的稳定性。